TALL-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406502

Übersicht

TNFSF13B kodiert TALL-1 (auch als BAFF bekannt), ein Zytokin der TNF-Superfamilie, das für das Überleben, die Reifung und die Immunglobulinproduktion von B-Zellen essenziell ist. TALL-1 signalisiert über Rezeptoren wie BAFF-R, TACI und BCMA und aktiviert dabei NF-κB sowie verwandte Überlebenssignalwege, wodurch die Homöostase peripherer B-Zellen und humorale Immunantworten mitgeprägt werden. Eine fehlregulierte TNFSF13B-Expression oder -Signalübertragung steht mit veränderter B-Zell-Toleranz und einem abnormen Fortbestehen von Plasmazellen in Zusammenhang und verknüpft diese Achse mit autoimmunassoziierter Immunaktivierung und B-Zell-getriebenen Entzündungszuständen. Als löslicher und membranassoziierter Ligand beeinflusst TALL-1 zudem die Kommunikation zwischen Immunzellen in lymphatischen Geweben und in entzündeten Mikroumgebungen.

Das TALL-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TNFSF13B-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TNFSF13B-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TNFSF13B nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TALL-1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TNFSF13B-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TALL-1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TNFSF13B-Exone abzielen, die für die TALL-1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TNFSF13B-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TALL-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TALL-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TNFSF13B-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TALL-1 HDR-Plasmid (h) und TALL-1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TNFSF13B-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TNFSF13B-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.