Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
T3JAM Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405338
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- T3JAM Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico T3JAM, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: T3JAM Antibody (B-7): sc-398781
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
T3JAM Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-405338 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
TRAF3IP3 (T3JAM) è una proteina di tipo adattatore coinvolta nella segnalazione delle cellule immunitarie, collegando gli eventi prossimali al recettore alle cascate di chinasi a valle che modulano programmi di attivazione, sopravvivenza e differenziamento. È stata associata alla regolazione di processi legati a MAPK e NF-κB e può influenzare gli output trascrizionali durante lo sviluppo dei linfociti e la segnalazione dei recettori per l’antigene. Alterazioni dell’espressione o della funzione di TRAF3IP3 sono state studiate nel contesto di una segnalazione infiammatoria deregolata e di vie associate a neoplasie ematologiche, in cui cambiamenti nell’equilibrio delle vie possono influire sulla proliferazione cellulare e sull’apoptosi. Queste proprietà rendono TRAF3IP3 un bersaglio utile per analizzare l’integrazione dei segnali in sistemi modello ematopoietici e di derivazione immunitaria.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO T3JAM (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TRAF3IP3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TRAF3IP3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TRAF3IP3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina T3JAM.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TRAF3IP3 per lo studio della segnalazione di T3JAM, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni TRAF3IP3 critici per la funzione di T3JAM
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TRAF3IP3 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal T3JAM CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal T3JAM CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TRAF3IP3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal T3JAM Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR T3JAM (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TRAF3IP3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TRAF3IP3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.