Plásmido Doble Nickase (h) T2R14: sc-410582-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)T2R14 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa T2R14 (h) y el plásmido de doble nickasa T2R14 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a TAS2R14. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) T2R14 | sc-410582-NIC | 20 µg | $410.00 |
TAS2R14 codifica el receptor humano del gusto amargo T2R14, un GPCR de clase A que detecta diversos compuestos amargos y se acopla a proteínas G heterotriméricas para regular la señalización de segundos mensajeros. La activación del receptor suele involucrar vías dependientes de PLCβ que elevan el calcio intracelular y modulan MAPK y otras redes de señalización aguas abajo, influyendo en la secreción, la motilidad y programas de defensa innata en tejidos extraorales. Se ha informado la expresión de TAS2R14 más allá del sistema gustativo, incluso en epitelios de las vías respiratorias y del tracto gastrointestinal, donde la señalización quimiosensorial puede moldear las respuestas de barrera e inflamatorias. La señalización alterada de receptores amargos se ha investigado en el contexto de la hiperreactividad de las vías respiratorias, afecciones inflamatorias crónicas y cambios de señalización asociados a tumores, lo que respalda su relevancia en estudios de mecanismos de enfermedad.
T2R14 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus TAS2R14 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de TAS2R14. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de TAS2R14. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con TAS2R14 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.