Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SYP/Synaptophysin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423242
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- SYP/Synaptophysin Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im SYP/Synaptophysin-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: SYP/Synaptophysin: sc-17750
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SYP/Synaptophysin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-423242 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Syp kodiert Synaptophysin (SYP), ein abundantes Glykoprotein der synaptischen Vesikelmembran, das im Nervensystem der Maus weithin als präsynaptischer Marker verwendet wird. SYP ist an Vesikeltransport, Exo‑Endozytose und aktivitätsabhängigem Recycling beteiligt, indem es mit der Vesikelfusions- und Endozytosemaschinerie interagiert und so die Fähigkeit zur Neurotransmitterfreisetzung aufrechterhält. Veränderungen der Synaptophysin-Expression und der präsynaptischen Vesikeldynamik werden mit gestörter synaptischer Konnektivität in Verbindung gebracht und häufig in Studien zu neuroentwicklungsbedingten und neurodegenerativen Mechanismen untersucht. Als Kernbestandteil präsynaptischer Endigungen bietet SYP einen funktionellen Ansatzpunkt, um Veränderungen auf Schaltkreisebene zu analysieren, die aus beeinträchtigtem Vesikelcycling entstehen.
Das SYP/Synaptophysin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Syp-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Syp-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Syp nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SYP/Synaptophysin-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Syp-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SYP/Synaptophysin-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Syp-Exone abzielen, die für die SYP/Synaptophysin-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Syp-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom SYP/Synaptophysin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom SYP/Synaptophysin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Syp-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SYP/Synaptophysin HDR-Plasmid (m) und SYP/Synaptophysin HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Syp-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Syp-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.