Synaptojanin 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423241
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Synaptojanin 2 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Synaptojanin 2-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Synaptojanin 2: sc-390247
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Synaptojanin 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-423241 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Das Mausgen **Synj2** kodiert **Synaptojanin 2**, eine Polyphosphoinositid-Phosphatase, die **PI(4,5)P2** und verwandte Phosphoinositide dephosphoryliert, um Membrantransport und Signalübertragung zu koordinieren. Synaptojanin 2 wirkt bei der clathrinvermittelten Endozytose, beim endosomalen Recycling und beim Umbau des Aktin-Zytoskeletts und beeinflusst dadurch die Internalisierung von Rezeptoren sowie die Dynamik phosphoinositidabhängiger Signalwege. Über die Regulation von Phosphoinositid-Pools wirkt es sich auf zelluläre Prozesse wie Migration, Neuritenauswuchs und Vesikelumsatz aus. Eine Fehlregulation des Phosphoinositid-Stoffwechsels und der endozytotischen Kontrolle wird in der Neurobiologie und bei krebsassoziierten Anpassungen der Signalübertragung diskutiert, wodurch **Synj2** ein nützliches Ziel für mechanistische Studien zur Membran- und Signalhomöostase ist.
Das Synaptojanin 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Synj2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Synj2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Synj2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Synaptojanin 2-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Synj2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Synaptojanin 2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Synj2-Exone abzielen, die für die Synaptojanin 2-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Synj2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom Synaptojanin 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Synaptojanin 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Synj2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Synaptojanin 2 HDR-Plasmid (m) und Synaptojanin 2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Synj2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Synj2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.