Synaptogyrin-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423238

Übersicht

Syngr1 kodiert Synaptogyrin‑1, ein Membranprotein synaptischer Vesikel, das an präsynaptischen Endigungen angereichert ist und zur Organisation der Vesikel sowie zu einer effizienten Neurotransmitterfreisetzung beiträgt. Es ist an zentralen Prozessen des synaptischen Vesikelzyklus beteiligt, darunter Vesikeltransport, Andocken und Endozytose, und ist funktionell mit Signalwegen verknüpft, die die Kopplung von Exo‑ und Endozytose sowie die Dynamik präsynaptischer Membranen regulieren. In Mausneuronen wird Synaptogyrin‑1 als Marker und als mechanistischer Knotenpunkt zur Untersuchung der synaptischen Transmission und Plastizität an exzitatorischen und inhibitorischen Synapsen verwendet. Veränderte Handhabung synaptischer Vesikel und präsynaptische Proteinnetzwerke unter Beteiligung von Synaptogyrin‑1 sind für die Forschung zu Mechanismen neuroentwicklungsbedingter und neurodegenerativer Erkrankungen relevant, die durch synaptische Dysfunktion gekennzeichnet sind.

Das Synaptogyrin-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Syngr1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Syngr1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Syngr1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Synaptogyrin-1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Syngr1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Synaptogyrin-1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Syngr1-Exone abzielen, die für die Synaptogyrin-1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Syngr1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Synaptogyrin-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Synaptogyrin-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Syngr1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Synaptogyrin-1 HDR-Plasmid (m) und Synaptogyrin-1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Syngr1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Syngr1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.