Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Synaptogyrin-1 (m): sc-423238
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Synaptogyrin-1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Synaptogyrin-1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Synaptogyrin-1 Antibody (A-6): sc-393456
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Synaptogyrin-1 (m) | sc-423238 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Syngr1 code la synaptogyrine‑1, une protéine membranaire des vésicules synaptiques enrichie aux terminaisons présynaptiques, qui contribue à l’organisation des vésicules et à une libération efficace des neurotransmetteurs. Elle participe aux processus fondamentaux du cycle des vésicules synaptiques, notamment le trafic vésiculaire, l’amarrage et l’endocytose, et s’inscrit fonctionnellement dans des voies régulant le couplage exo‑endocytique et la dynamique de la membrane présynaptique. Dans les neurones de souris, la synaptogyrine‑1 est utilisée comme marqueur et nœud mécanistique pour étudier la transmission synaptique et la plasticité aux synapses excitatrices et inhibitrices. Des altérations de la prise en charge des vésicules synaptiques et des réseaux protéiques présynaptiques impliquant la synaptogyrine‑1 sont pertinentes pour la recherche sur les mécanismes des maladies neurodéveloppementales et neurodégénératives caractérisées par une dysfonction synaptique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Synaptogyrin-1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Syngr1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Syngr1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Syngr1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Synaptogyrin-1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Syngr1 pour l'étude de la signalisation de Synaptogyrin-1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Syngr1 essentiels à la fonction de Synaptogyrin-1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Syngr1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Synaptogyrin-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Synaptogyrin-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Syngr1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Synaptogyrin-1 plasmide HDR (m) et le Synaptogyrin-1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Syngr1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Syngr1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.