Superoxide Dismutase 3/SOD3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423071

Descripción general

El gen Sod3 de ratón codifica la superóxido dismutasa extracelular (SOD3), una enzima secretada dependiente de Cu/Zn que cataliza la dismutación del anión superóxido a peróxido de hidrógeno y oxígeno, contribuyendo así a mantener la homeostasis redox en la matriz extracelular y en la superficie celular. Al limitar la modificación oxidativa de lípidos y proteínas y preservar la biodisponibilidad del óxido nítrico, SOD3 influye en la señalización vascular, el reclutamiento de células inflamatorias y la remodelación de la matriz extracelular. La actividad alterada de SOD3 se asocia a fenotipos impulsados por el estrés oxidativo relevantes para la biología cardiopulmonar y vascular, incluidos procesos como la disfunción endotelial, la fibrosis y la inflamación crónica. Estas características hacen de Sod3 un nodo clave para estudiar el manejo de las ROS extracelulares y las redes de señalización reguladas por el estado redox en modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Superoxide Dismutase 3/SOD3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Sod3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Sod3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Sod3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Superoxide Dismutase 3/SOD3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Sod3 para la investigación de la señalización de Superoxide Dismutase 3/SOD3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Sod3 críticos para la función de Superoxide Dismutase 3/SOD3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Sod3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Superoxide Dismutase 3/SOD3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Superoxide Dismutase 3/SOD3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Sod3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Superoxide Dismutase 3/SOD3 (m) y el plásmido HDR Superoxide Dismutase 3/SOD3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Sod3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Sod3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.