Superoxide Dismutase 3/SOD3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423071

Übersicht

Das Mausgen *Sod3* kodiert die extrazelluläre Superoxiddismutase (SOD3), ein sezerniertes, Cu/Zn‑abhängiges Enzym, das die Dismutation des Superoxid-Anions zu Wasserstoffperoxid und Sauerstoff katalysiert und dadurch die Redoxhomöostase in der extrazellulären Matrix und an der Zelloberfläche mitprägt. Indem SOD3 die oxidative Modifikation von Lipiden und Proteinen begrenzt und die Bioverfügbarkeit von Stickstoffmonoxid erhält, beeinflusst es die vaskuläre Signalübertragung, die Rekrutierung von Entzündungszellen und den Umbau der extrazellulären Matrix. Eine veränderte SOD3-Aktivität ist mit durch oxidativen Stress getriebenen Phänotypen verknüpft, die für die kardiopulmonale und vaskuläre Biologie relevant sind, darunter Prozesse wie endotheliale Dysfunktion, Fibrose und chronische Entzündung. Diese Eigenschaften machen *Sod3* zu einem zentralen Knotenpunkt für die Untersuchung des extrazellulären ROS‑Handlings und redoxregulierter Signalnetzwerke in Mausmodellen.

Das Superoxide Dismutase 3/SOD3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Sod3-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Sod3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Sod3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Superoxide Dismutase 3/SOD3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Sod3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Superoxide Dismutase 3/SOD3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Sod3-Exone abzielen, die für die Superoxide Dismutase 3/SOD3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Sod3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Superoxide Dismutase 3/SOD3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Superoxide Dismutase 3/SOD3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Sod3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Superoxide Dismutase 3/SOD3 HDR-Plasmid (m) und Superoxide Dismutase 3/SOD3 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Sod3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Sod3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.