Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SUN2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404746
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SUN2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SUN2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SUN2 Anticuerpo (G-5): sc-377459
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SUN2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404746 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SUN2 codifica una proteína de la membrana nuclear interna que contiene un dominio SUN y que constituye un componente central del complejo LINC (conector entre el nucleoesqueleto y el citoesqueleto). Al unirse a las láminas nucleares e interactuar con proteínas con dominio KASH a través del espacio perinuclear, SUN2 acopla el núcleo al citoesqueleto de actina para regular el posicionamiento nuclear, la mecanotransducción y la transmisión de fuerzas del citoesqueleto. SUN2 contribuye a la integridad de la envoltura nuclear, la organización de la cromatina y las respuestas al daño del ADN que dependen de una conectividad núcleo‑citoesquelética adecuada. La desregulación de componentes del complejo LINC, incluido SUN2, se ha asociado con fenotipos relevantes para las laminopatías, la cardiomiopatía, los trastornos musculares y cambios en la arquitectura nuclear vinculados al cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SUN2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SUN2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SUN2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SUN2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SUN2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SUN2 para la investigación de la señalización de SUN2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SUN2 críticos para la función de SUN2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SUN2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SUN2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SUN2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SUN2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SUN2 (h) y el plásmido HDR SUN2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SUN2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SUN2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.