Particules Lentivirales d'Activation (m) SULT2B1: sc-424817-LAC

Le gène murin **Sult2b1** code la sulfotransférase cytosolique **SULT2B1**, une enzyme qui catalyse la sulfatation, dépendante de la **3′-phosphoadénosine-5′-phosphosulfate (PAPS)**, des hydroxystéroïdes et des oxystérols, notamment le cholestérol et des stérols apparentés. En convertissant des stérols lipophiles en métabolites sulfatés plus polaires, SULT2B1 contribue à réguler l’homéostasie des stérols, la composition membranaire et la disponibilité des hormones stéroïdiennes, avec des effets en aval sur la signalisation des récepteurs nucléaires et les programmes du métabolisme lipidique. L’activité de SULT2B1 est associée à des voies impliquées dans la différenciation épidermique et la formation de la barrière cutanée, la gestion des lipides par les macrophages et le métabolisme lipidique hépatique, ce qui la rend pertinente pour l’étude de l’inflammation, des dysfonctionnements métaboliques et des troubles de l’équilibre cholestérol/stérols.

Les particules d'activation lentivirales SULT2B1 (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Sult2b1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales SULT2B1 (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Sult2b1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de SULT2B1. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Sult2b1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.