Plasmide Double Nickase (h) striatin: sc-406215-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) striatin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide striatin Double Nickase (h) et le plasmide striatin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant STRN. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: striatin Antibody (6): sc-136084
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) striatin | sc-406215-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) striatin | sc-406215-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **STRN** code la **striatine**, une protéine échafaudage (scaffold) liant la calmoduline au sein du complexe **STRIPAK** (striatin-interacting phosphatase and kinase), qui coordonne la signalisation associée à **PP2A**, la régulation des kinases et l’assemblage de complexes multiprotéiques au niveau des membranes cellulaires et des sites jonctionnels. Par ces interactions, la striatine contribue à l’intégration de signaux dépendants du calcium avec des voies contrôlant la dynamique du cytosquelette, la polarité cellulaire, le trafic vésiculaire et des réseaux de signalisation liés à la prolifération. Une altération de la fonction **STRN/STRIPAK** a été associée à une transduction du signal et à une organisation jonctionnelle dérégulées, dans des contextes pertinents pour le remodelage de voies oncogéniques et l’homéostasie spécifique des tissus. Ces propriétés font de **STRN** une cible utile pour disséquer les interactions entre voies médiées par des protéines échafaudage et l’équilibre phosphatase–kinase dans les cellules humaines.
striatin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus STRN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de STRN. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de STRN. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de STRN.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.