Stim1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401311

개요

STIM1은 소포체(ER) Ca2+ 센서인 stromal interaction molecule 1(Stim1)을 암호화하며, ER–세포막 접합부에서 ER 내 Ca2+ 고갈을 ORAI 채널의 활성화와 결합시켜 저장고 의존성 칼슘 유입(store-operated calcium entry, SOCE)을 개시합니다. 이렇게 유입된 Ca2+는 NFAT 의존적 전사, 세포골격 재구성, 분비, 그리고 증식 및 스트레스 반응을 조절하는 보다 광범위한 칼슘 의존성 신호 네트워크를 조절합니다. STIM1 의존성 경로는 면역세포 활성화와 기타 흥분성/비흥분성 세포 기능의 핵심이며, 변화된 칼슘 항상성을 면역학적 표현형 및 추가적인 병태생리와 연결합니다. 인간 질환 생물학에서는, 비정상적인 Ca2+ 유입과 그에 따른 하위 전사 프로그램이 세포 상태 결정에 미치는 영향을 중심으로 STIM1 신호의 이상 조절이 자주 연구됩니다.

Stim1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 STIM1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 STIM1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 STIM1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Stim1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Stim1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 STIM1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Stim1 기능에 중요한 STIM1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 STIM1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Stim1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Stim1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 STIM1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Stim1 HDR 플라스미드 (h) 및 Stim1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 STIM1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 STIM1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.