Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Stat6 Double Nickase Plasmid (h): sc-418159-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Stat6 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Stat6 Double-Nickase-Plasmid (h) und Stat6 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf STAT6 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Stat6: sc-374021
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Stat6 Double Nickase Plasmid (h) | sc-418159-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Stat6 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-418159-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STAT6 kodiert Stat6, einen latenten Transkriptionsfaktor, der nachgeschaltet an die IL‑4‑ und IL‑13‑Rezeptorsignalisierung über JAK-Kinasen aktiviert wird – mit anschließender phosphorylierungsabhängiger Dimerisierung und Translokation in den Zellkern. Im Zellkern bindet Stat6 an regulatorische DNA-Elemente und steuert Genprogramme, die an der Th2-Differenzierung, der alternativen Makrophagenaktivierung, dem epithelialen Remodeling und dem Klassenwechsel von Immunglobulinen beteiligt sind. Dieser Signalweg verknüpft Zytokin-Signale mit Chromatin- und Transkriptionsmaschinerie und prägt so allergische Entzündungen sowie Typ‑2‑Immunantworten. Eine fehlregulierte STAT6-Aktivität wird mit Mechanismen von Asthma und atopischen Erkrankungen in Verbindung gebracht und wird außerdem in Kontexten tumorassoziierter Immunpolarisierung sowie zytokingetriebener Zellzustandsübergänge untersucht.
Stat6 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des STAT6-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von STAT6 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die STAT6-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit STAT6-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.