Stat2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2): sc-423175-KO-2
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Stat2 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m2) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Stat2-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Stat2: sc-514193
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Stat2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) | sc-423175-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Der Signaltransducer und Aktivator der Transkription 2 (Stat2) ist ein zentraler Transkriptionsfaktor der Typ‑I‑ und Typ‑III‑Interferon-Signalübertragung in Mauszellen. Er bildet zusammen mit STAT1 und IRF9 den ISGF3-Komplex, der die Expression interferon-stimulierter Gene antreibt. Nach Bindung an IFNAR/IFNLR phosphorylieren JAK1 und TYK2 STAT2 und koordinieren so antivirale Abwehrprogramme, Antigenpräsentation und eine umfassendere transkriptionelle Umprogrammierung der angeborenen Immunantwort. Die Stat2-Aktivität prägt die Wechselwirkungen mit NF‑κB‑ und MAPK-assoziierten entzündlichen Signalwegen und beeinflusst Entscheidungen über den Zellzustand während Infektion und Immunaktivierung. Eine fehlregulierte STAT2-abhängige Signalübertragung wurde mit veränderter Anfälligkeit gegenüber Virusinfektionen und immunvermittelter Pathologie in Verbindung gebracht, weshalb Stat2 häufig als genetischer Knotenpunkt für mechanistische Studien von Interferonantworten genutzt wird.
Das Stat2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Stat2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Stat2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Stat2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Stat2-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Stat2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Stat2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Stat2-Exone abzielen, die für die Stat2-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Stat2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom Stat2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Stat2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Stat2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Stat2 HDR-Plasmid (m) und Stat2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Stat2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Stat2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.