Stabilin-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406773
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Stabilin-1 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Stabilin-1-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Stabilin-1: sc-293254
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Stabilin-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-406773 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
STAB1 kodiert Stabilin-1, einen multifunktionalen Scavenger-Rezeptor, der vorwiegend von Endothelzellen und alternativ aktivierten Makrophagen exprimiert wird und dort die Endozytose sowie die Clearance vielfältiger Liganden unterstützt, darunter modifizierte Lipoproteine und Material aus apoptotischen Zellen. Über seine Funktionen bei der rezeptorvermittelten Aufnahme, dem intrazellulären Transport und der Zelladhäsion trägt Stabilin-1 zur vaskulären Homöostase, Immunregulation und zu Umbauprozessen in Gewebe-Mikroumgebungen bei. Die Aktivität von STAB1 wird häufig im Kontext der Makrophagenpolarisierung sowie der stromal-immunologischen Crosstalk-Mechanismen untersucht, die inflammatorische Signalwege und den Umsatz der extrazellulären Matrix prägen. Eine dysregulierte STAB1-Expression wurde mit chronisch-entzündlichen Zuständen und der Biologie tumorassoziierter Makrophagen in Verbindung gebracht und bietet damit einen mechanistischen Ansatzpunkt, um myeloide Beiträge zu krankheitsrelevanten Mikroumgebungen zu untersuchen.
Das Stabilin-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des STAB1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des STAB1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von STAB1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Stabilin-1-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von STAB1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Stabilin-1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf STAB1-Exone abzielen, die für die Stabilin-1-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere STAB1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom Stabilin-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Stabilin-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des STAB1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Stabilin-1 HDR-Plasmid (h) und Stabilin-1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von STAB1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten STAB1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.