ST8Sia III Lentiviral Activation Particles (h): sc-407120-LAC

ST8SIA3 kodiert die Sialyltransferase ST8Sia III, ein im Golgi-Apparat lokalisiertes Enzym, das die α2,8-verknüpfte Sialylierung von Glykoproteinen und Glykolipiden katalysiert und damit die Zusammensetzung sowie Erkennung von Zelloberflächen-Glykanen prägt. Durch die Regulation der Polysialylierung und verwandter sialylierter Determinanten beeinflusst ST8Sia III Zell–Zell- und Zell–Matrix-Interaktionen, die Organisation von Rezeptoren sowie den Transport in sekretorischen und endozytotischen Signalwegen. Veränderte Sialylierungsmuster gehen mit Veränderungen in Adhäsion, Migration und Immunerkennung einher, wodurch ST8SIA3 für Studien zu neuroentwicklungsbezogenen Prozessen und tumorassoziierten Glykosylierungsphänotypen relevant ist. Die funktionelle Untersuchung von ST8SIA3 kann klären, wie α2,8-Sialylierung Signalnetzwerke und die Biologie von Membran-Glykoproteinen in humanen Zellen moduliert.

ST8Sia III Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ST8SIA3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ST8Sia III Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ST8SIA3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ST8Sia III-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ST8SIA3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.