St3Gal-III Lentiviral Activation Particles (h): sc-406298-LAC

ST3GAL3 kodiert die im Golgi-Apparat lokalisierte Sialyltransferase St3Gal-III, die die Addition von α2,3-verknüpfter Sialinsäure an Galaktose auf Glykoproteinen und Glykolipiden katalysiert und so terminale Glykanstrukturen auf der Zelloberfläche sowie auf sezernierten Proteinen prägt. Durch die Kontrolle von Sialylierungsmustern beeinflusst St3Gal-III die Reifung von Glykoproteinen, die Stabilität von Rezeptoren und lektinvermittelte Interaktionen, die sich auf Zell-Signalgebung, Adhäsion und Immunerkennung auswirken. Die Aktivität von ST3GAL3 trägt zu umfassenderen Glykosylierungswegen bei, die den Transport durch den sekretorischen Weg und das Remodeling der Glykokalyx regulieren. Genetische Variation oder Fehlregulation von ST3GAL3 wurde mit neurodevelopmentalen Phänotypen und veränderten Glykom-Signaturen in Verbindung gebracht, die für neuronale Funktion und krankheitsassoziierte Veränderungen der Zell-Zell-Kommunikation relevant sind.

St3Gal-III Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ST3GAL3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

St3Gal-III Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ST3GAL3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen St3Gal-III-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ST3GAL3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.