Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) SRPK2: sc-403763-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SRPK2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SRPK2 Double Nickase (h) et le plasmide SRPK2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SRPK2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SRPK2 Antibody (H-5): sc-390534
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SRPK2 | sc-403763-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SRPK2 | sc-403763-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SRPK2 (kinase 2 spécifique des protéines riches en sérine/arginine) est une kinase à double spécificité qui phosphoryle les facteurs d’épissage SR, coordonnant l’assemblage du spliceosome et l’épissage alternatif des pré-ARNm. En régulant le traitement de l’ARN, SRPK2 influence la progression du cycle cellulaire, la signalisation de stress et la diversification du protéome, et peut interagir fonctionnellement avec des voies dépendantes de kinases qui façonnent le contrôle transcriptionnel et post-transcriptionnel de l’expression génique. Une activité altérée de SRPK2 a été associée dans la littérature à des programmes d’épissage dérégulés et à des phénotypes prolifératifs anormaux ou d’adaptation au stress, ce qui en fait un nœud utile pour étudier la biologie de l’ARN dans le cancer et d’autres maladies présentant des défauts d’épissage.
SRPK2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SRPK2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SRPK2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SRPK2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SRPK2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.