Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO SRm300 (h): sc-403447
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- SRm300 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique SRm300, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SRm300 Antibody (C-9): sc-390315
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO SRm300 (h) | sc-403447 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
SRRM2 code pour SRm300, un grand cofacteur d’épissage riche en sérine/arginine qui se localise dans les speckles nucléaires et favorise l’assemblage du spliceosome ainsi que le traitement des pré-ARNm. SRm300 contribue aux décisions d’épissage alternatif et coordonne le couplage transcription–épissage, influençant la maturation des ARN, l’aptitude des ARNm à être exportés et la diversité du protéome. Par ces fonctions, SRRM2 impacte des voies liées à la régulation du cycle cellulaire, aux réponses aux dommages de l’ADN et à des programmes d’expression génique d’adaptation au stress. La dérégulation de réseaux d’épissage dépendants de SRRM2 a été associée à une utilisation aberrante d’isoformes observée dans des contextes de cancer et de maladies neurodéveloppementales ou neurodégénératives, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques du traitement de l’ARN.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SRm300 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SRRM2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SRRM2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SRRM2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SRm300.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SRRM2 pour l'étude de la signalisation de SRm300, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de SRRM2 essentiels à la fonction de SRm300
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SRRM2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le SRm300 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le SRm300 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SRRM2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le SRm300 plasmide HDR (h) et le SRm300 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SRRM2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SRRM2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.