SP140 Lentiviral Activation Particles (m): sc-436685-LAC

Maus-Sp140 kodiert SP140, ein nukleäres, chromatinassoziiertes Protein, das in Immunzellen angereichert ist und zur Ausprägung von Transkriptionsprogrammen beiträgt, die mit Zellidentität und Entzündungsreaktionen verknüpft sind. SP140 enthält epigenetische Reader-Domänen, die an Chromatin lokalisieren und die Zugänglichkeit an linienspezifisch regulierten Genorten beeinflussen; es ist in Signalwege integriert, die die Expression interferonstimulierter Gene, die Antigenpräsentation und die Aktivierung der angeborenen Immunität steuern. Eine veränderte SP140-Funktion wurde mit fehlregulierter inflammatorischer Signalübertragung und einer erhöhten Anfälligkeit für immunvermittelte Krankheitsphänotypen in Verbindung gebracht, was SP140 für mechanistische Studien zur Transkriptionskontrolle in myeloiden und lymphoiden Kompartimenten relevant macht. In Mausmodellen wird die gezielte Beeinflussung von Sp140 genutzt, um zu untersuchen, wie Chromatinregulation mit zytokingetriebener Signalgebung und der Differenzierung von Immunzellen zusammenwirkt.

SP140 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Sp140-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

SP140 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Sp140-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen SP140-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Sp140-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.