Plásmido Doble Nickase (h) Sox9: sc-400143-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Sox9 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Sox9 (h) y el plásmido de doble nickasa Sox9 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SOX9. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Sox9 Anticuerpo (E-9): sc-166505
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Sox9 | sc-400143-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Sox9 | sc-400143-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SOX9 codifica el factor de transcripción Sox9, una proteína de unión al ADN del grupo de alta movilidad (HMG) que regula la especificación de linaje y los programas de diferenciación en múltiples tejidos. Durante el desarrollo y en la homeostasis del adulto, Sox9 integra señales como TGF-β/BMP, WNT/β-catenina, Hedgehog y Notch para controlar redes génicas implicadas en la condrogénesis, el mantenimiento de células madre/progenitoras y las decisiones de destino de las células epiteliales. La actividad de SOX9 influye en la producción de matriz extracelular y en la dinámica del ciclo celular mediante el control transcripcional directo de loci diana y la cooperación con factores de transcripción asociados. La expresión o función desregulada de SOX9 se ha asociado con trastornos esqueléticos congénitos y contribuye a estados patogénicos que implican diferenciación aberrante y programas transcripcionales oncogénicos, lo que lo convierte en un nodo ampliamente utilizado para estudios mecanísticos del desarrollo y la biología de la enfermedad.
Sox9 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SOX9 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SOX9. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SOX9. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SOX9 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.