Plásmido Doble Nickase (h) Sox10: sc-400129-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Sox10 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Sox10 (h) y el plásmido de doble nickasa Sox10 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SOX10. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Sox10 Anticuerpo (A-2): sc-365692
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Sox10 | sc-400129-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Sox10 | sc-400129-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SOX10 codifica el factor de transcripción Sox10 de la familia SRY-box, un regulador definitorio de linaje del desarrollo de la cresta neural que controla programas de diferenciación y mantenimiento en células de Schwann, oligodendrocitos y melanocitos. Sox10 coordina redes de expresión génica implicadas en la especificación del destino glial, la mielinización y la biología de las células pigmentarias, integrándose con señales del desarrollo como Wnt y Notch para moldear la identidad y la maduración celular. La alteración de los circuitos transcripcionales dependientes de SOX10 se asocia con fenotipos de neurocristopatía y se ha implicado en trastornos congénitos que afectan la función del sistema nervioso periférico y la pigmentación, así como en la biología del melanoma. En sistemas modelo humanos, SOX10 actúa como un nodo clave para estudiar la regulación transcripcional, las transiciones de estado celular y las redes reguladoras génicas del desarrollo.
Sox10 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SOX10 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SOX10. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SOX10. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SOX10 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.