SOBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412439

Visão geral

SOBP (sine oculis-binding protein) é uma proteína nuclear envolvida em programas de regulação transcricional necessários para o desenvolvimento do ouvido interno e do sistema sensorial, com funções na especificação do destino celular e no padrão de organização dos tecidos. Evidências genéticas humanas associam variantes de perda de função em SOBP à surdez autossômica recessiva e a fenótipos de neurodesenvolvimento, destacando sua importância na formação das vias auditivas e na maturação neuronal. Assim, a perturbação de SOBP é relevante para o estudo de redes regulatórias gênicas que coordenam diferenciação, morfogênese e função de órgãos sensoriais. Em modelos celulares, a desativação de SOBP pode ser usada para investigar respostas transcricionais a jusante e processos de sinalização do desenvolvimento que moldam o comprometimento com linhagens sensoriais.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SOBP (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SOBP em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SOBP, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SOBP na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SOBP.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SOBP para a investigação da sinalização de SOBP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SOBP críticos para a função SOBP
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SOBP para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SOBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SOBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SOBP. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SOBP Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SOBP (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SOBP para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SOBP definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.