Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SNX1 Double Nickase Plasmid (h): sc-404470-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das SNX1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- SNX1 Double-Nickase-Plasmid (h) und SNX1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf SNX1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: SNX1: sc-376376
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SNX1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-404470-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SNX1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-404470-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Sorting Nexin 1 (SNX1) ist ein endosomales Protein mit PX-Domäne, das an Phosphatidylinositol-3-phosphat bindet und mit dem Retromer-Komplex zusammenwirkt, um die endosomale Sortierung sowie den retrograden Transport von Endosomen zum Trans-Golgi-Netzwerk zu regulieren. Durch die Formung endosomaler Membrantubuli und die Beeinflussung des Rezeptor-Transports trägt SNX1 zur Kontrolle des Recyclings und der Herunterregulation zahlreicher Signalrezeptoren bei und ist damit mit Signalwegen wie EGFR und anderen Rezeptor-Tyrosinkinase-Netzwerken verknüpft. SNX1-abhängiger Transport beeinflusst Prozesse der zellulären Homöostase, darunter den Umsatz von Membranproteinen, die Nährstoffaufnahme und die Abschwächung von Signalübertragung. Eine dysregulierte SNX1-Expression oder -Funktion wurde mit veränderter Rezeptorsignalgebung und endosomaler Dynamik in Verbindung gebracht, wie in Forschungszusammenhängen der Krebsbiologie und neurodegenerationsbezogenen Forschung beschrieben.
SNX1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des SNX1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von SNX1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die SNX1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit SNX1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.