SNAP47 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-410264

Übersicht

SNAP47 kodiert ein Protein der SNAP‑Rezeptor-(SNARE-)Familie, das am Andocken von Vesikeln und an der Membranfusion beteiligt ist, indem es mit passenden Syntaxinen und VAMPs interagiert und so Exozytose sowie endomembranen Transport reguliert. Es wurde mit spezialisierten sekretorischen Signalwegen in Verbindung gebracht, darunter die Freisetzung von Neurotransmittern und die regulierte Zustellung von Fracht, wodurch die SNAP47‑Aktivität mit dem synaptischen Vesikelzyklus, dem Membranrecycling und der räumlichen Kontrolle der Proteinlokalisation verknüpft ist. Über seine Rolle in der Dynamik von SNARE‑Komplexen beeinflusst SNAP47 zelluläre Prozesse wie Neuritenwachstum, Rezeptortransport und stimulusgekoppelte Sekretion. Eine dysregulierte Vesikeltransport- und Synapsensignalgebung ist in der neuroentwicklungs- und neurodegenerationsbezogenen Forschung relevant, weshalb SNAP47 ein nützliches Ziel zur Untersuchung transportabhängiger Phänotypen darstellt.

Das SNAP47 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SNAP47-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SNAP47-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SNAP47 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SNAP47-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SNAP47-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SNAP47-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SNAP47-Exone abzielen, die für die SNAP47-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SNAP47-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SNAP47 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SNAP47 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SNAP47-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SNAP47 HDR-Plasmid (h) und SNAP47 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SNAP47-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SNAP47-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.