Plásmido Doble Nickase (h) Slfn5: sc-408333-NIC

La SLFN5 humana (Slfn5) es una proteína de la familia Schlafen inducida por interferón, implicada en la regulación de programas transcripcionales vinculados a la inmunidad innata, el control del ciclo celular y la diferenciación celular. Se ha descrito que Slfn5 modula la expresión génica aguas abajo de la señalización interferón/JAK–STAT e influye en redes de respuesta inflamatoria y antiviral, incluidos efectos sobre la regulación transcripcional asociada a la cromatina. La alteración de la expresión de SLFN5 se ha asociado con cambios en la proliferación y migración de células tumorales, así como en firmas génicas relacionadas con la inmunidad en múltiples contextos de cáncer, lo que respalda su utilidad como un nodo mecanístico en estudios de señalización oncogénica e inflamatoria. Estas propiedades hacen de SLFN5 un objetivo relevante para diseccionar vías impulsadas por interferón, la regulación transcripcional y fenotipos dependientes del contexto en modelos celulares humanos.

Slfn5 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLFN5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLFN5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLFN5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLFN5 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.