Slfn3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423018

Übersicht

Slfn3 (schlafen 3) kodiert ein Mitglied der Schlafen-Familie, das in Mausgeweben an der Regulation der zellulären Differenzierung, Proliferation und immunassoziierten Programme beteiligt ist. Schlafen-Proteine werden häufig mit interferonresponsiven Signalwegen, der Modulation von Translation sowie RNA-Stoffwechsel und einer kontextabhängigen Kontrolle der Zellzyklusprogression in Verbindung gebracht. In epithelialen Modellen wurde Slfn3 als Faktor untersucht, der mit dem Differenzierungszustand und der Expression barrierebezogener Gene assoziiert ist, wodurch es mit Signalwegen verknüpft wird, die die Gewebehomöostase und entzündliche Antworten beeinflussen. Eine veränderte Aktivität der Schlafen-Familie wurde in Zusammenhängen von Immundysregulation und Tumorbiologie untersucht, was Slfn3 zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien zur Wachstumskontrolle und zu Netzwerken der Immunsignalgebung macht.

Das Slfn3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Slfn3-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Slfn3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Slfn3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Slfn3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Slfn3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Slfn3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Slfn3-Exone abzielen, die für die Slfn3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Slfn3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Slfn3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Slfn3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Slfn3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Slfn3 HDR-Plasmid (m) und Slfn3 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Slfn3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Slfn3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.