Plasmide Double Nickase (h) Slfn13: sc-414596-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Slfn13 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Slfn13 Double Nickase (h) et le plasmide Slfn13 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLFN13. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Slfn13 | sc-414596-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Slfn13 | sc-414596-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLFN13 (Schlafen family member 13) code Slfn13, une endoribonucléase putative dirigée par l’ARN, impliquée dans le contrôle post‑transcriptionnel de l’expression génique et dans les programmes d’immunité innée cellulaire. En tant que composant du réseau de gènes stimulés par l’interféron, SLFN13 est associé à la régulation de la stabilité et/ou de la traduction des ARN, à la modulation des réponses au stress, ainsi qu’au contrôle des états de prolifération et de différenciation. Les protéines Schlafen sont fréquemment liées à la restriction antivirale et aux voies de signalisation immunitaire, notamment aux programmes transcriptionnels de l’interféron et de l’inflammation. Une activité dérégulée de la famille SLFN a été observée dans des contextes de dysfonctionnement immunitaire et de biologie des cancers, ce qui soutient l’utilisation de perturbations de SLFN13 pour étudier le métabolisme de l’ARN et des phénotypes associés à l’interféron.
Slfn13 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLFN13 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLFN13. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLFN13. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLFN13.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.