Plásmido Doble Nickase (h) Slfn12: sc-404339-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Slfn12 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Slfn12 (h) y el plásmido de doble nickasa Slfn12 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLFN12. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Slfn12 | sc-404339-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Slfn12 | sc-404339-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **SLFN12** codifica el miembro 12 de la familia Schlafen (Slfn12), una proteína citosólica implicada en la regulación de la diferenciación celular y en el control posranscripcional de la expresión génica. Las proteínas SLFN se asocian de forma amplia con la modulación del metabolismo del ARN y de programas de traducción que moldean la proliferación y las respuestas adaptativas al estrés, situando a SLFN12 en la interfaz entre el control del crecimiento y las transiciones de estado celular. Se han examinado la actividad alterada de SLFN12 y sus patrones de expresión en contextos en los que se perturban la diferenciación y el equilibrio del ciclo celular, lo que respalda su relevancia para estudios mecanísticos del crecimiento desregulado y del compromiso de linaje en modelos asociados a enfermedad. Como parte de la red Schlafen más amplia sensible a interferón, SLFN12 también se utiliza para explorar cómo la señalización inmunitaria innata se cruza con el control fundamental de la expresión génica.
Slfn12 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLFN12 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLFN12. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLFN12. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLFN12 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.