SLC35F2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406765

Übersicht

SLC35F2 kodiert einen voraussichtlich multipassigen Membrantransporter, der an intrazellulären Membranen lokalisiert ist. Es gibt Hinweise darauf, dass er an der Solut‑Traffickierung beteiligt ist und dadurch die zelluläre Aufnahme sowie die kompartimentelle Verteilung kleiner Moleküle beeinflusst. Als Mitglied der SLC35‑Familie ist SLC35F2 mit Membrantransportprozessen verknüpft, die die metabolische Homöostase, die Organellfunktion und zelluläre Stressantworten beeinflussen können. Eine veränderte Transporteraktivität kann die intrazelluläre Exposition gegenüber Xenobiotika und endogenen Metaboliten modulieren und verbindet SLC35F2 damit mit Mechanismen, die für Pharmakologie und Krebszellbiologie relevant sind. Entsprechend wird SLC35F2 häufig in Studien zur transportabhängigen Sensitivität, zur zellulären Fitness und zu Signalweg‑Determinanten der Wirkstoffantwort untersucht.

Das SLC35F2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SLC35F2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SLC35F2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SLC35F2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SLC35F2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SLC35F2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SLC35F2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SLC35F2-Exone abzielen, die für die SLC35F2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SLC35F2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SLC35F2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SLC35F2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SLC35F2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SLC35F2 HDR-Plasmid (h) und SLC35F2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SLC35F2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SLC35F2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.