SLC25A48 Double Nickase Plasmid (h): sc-414730-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das SLC25A48 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- SLC25A48 Double-Nickase-Plasmid (h) und SLC25A48 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf SLC25A48 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SLC25A48 Double Nickase Plasmid (h) | sc-414730-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC25A48 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-414730-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC25A48 kodiert ein Mitglied der mitochondrialen Solute-Carrier-Familie, das an Transportprozessen über die innere Mitochondrienmembran beteiligt ist und den Austausch von Metaboliten mit der Effizienz der oxidativen Phosphorylierung sowie der zellulären Energiebilanz verknüpft. Indem SLC25A48 die Verfügbarkeit mitochondrialer Substrate und die Redoxhomöostase mitprägt, ist das Protein in der Lage, Stressantworten, metabolische Umprogrammierungen und zelluläre Zustandsübergänge zu beeinflussen, die von der mitochondrialen Funktion abhängen. Eine veränderte Regulation mitochondrialer Carrier wird häufig im Zusammenhang mit Stoffwechselerkrankungen, Neurodegeneration und der krebsassoziierten bioenergetischen Umverdrahtung untersucht, wodurch SLC25A48 ein geeigneter Knotenpunkt für mechanistische Analysen ist. Die funktionelle Untersuchung von SLC25A48 kann helfen zu klären, wie mitochondrialer Transport mit Signalwegen zusammenspielt, die die ATP-Produktion, den Umgang mit reaktiven Sauerstoffspezies und die Empfindlichkeit gegenüber Apoptose steuern.
SLC25A48 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des SLC25A48-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von SLC25A48 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die SLC25A48-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit SLC25A48-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.