SLC25A36 Double Nickase Plasmid (m): sc-431417-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das SLC25A36 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- SLC25A36 Double-Nickase-Plasmid (m) und SLC25A36 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Slc25a36 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SLC25A36 Double Nickase Plasmid (m) | sc-431417-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC25A36 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-431417-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc25a36 kodiert SLC25A36, einen Solut-Carrier der inneren Mitochondrienmembran, der an der Aufrechterhaltung der Nukleotidhomöostase beteiligt ist, indem er den Transport von Pyrimidin-Nukleotiden und verwandten Metaboliten über die Mitochondrienmembran vermittelt. Durch die Regulierung intramitochondrialer Nukleotidpools unterstützt SLC25A36 die Replikation und Reparatur der mitochondrialen DNA, die Leistungsfähigkeit der oxidativen Phosphorylierung sowie den übergeordneten mitochondrialen Stoffwechselfluss. Störungen des mitochondrialen Nukleotidtransports können die Bioenergetik und Stressantworten beeinträchtigen – Prozesse, die mit neurodevelopmentalen und neuromuskulären Phänotypen sowie weiteren Erkrankungen im Zusammenhang mit mitochondrialer Dysfunktion verknüpft sind. In Mausmodellen stellt Slc25a36 ein gut handhabbares Ziel dar, um zu untersuchen, wie Nukleotidtransport mit der Erhaltung des mitochondrialen Genoms, dem Redox-Gleichgewicht und Zellzustandsübergängen zusammenhängt.
SLC25A36 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Slc25a36-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Slc25a36 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Slc25a36-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Slc25a36-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.