SLC25A36 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-412475

Übersicht

SLC25A36 kodiert einen Soluttransporter der inneren Mitochondrienmembran, der als Nukleotidtransporter fungiert und den Austausch von Pyrimidinnukleotiden zwischen dem Zytosol und der mitochondrialen Matrix unterstützt. Indem SLC25A36 die Verfügbarkeit von dNTPs innerhalb der Mitochondrien aufrechterhält, trägt es zur Replikation und Reparatur der mitochondrialen DNA, zur Leistungsfähigkeit der oxidativen Phosphorylierung und zur allgemeinen mitochondrialen Homöostase bei. Störungen des Nukleotidtransports können mitochondriale Dysfunktion mit verändertem Energiestoffwechsel, Redox-Gleichgewicht und Replikationsstress verknüpfen – Prozesse, die häufig im Zusammenhang mit Neurodegeneration, inflammatorischer Signalgebung und Tumorbiologie untersucht werden. Als Mitglied der mitochondrialen Carrier-Familie wird SLC25A36 häufig im Kontext von Organellenbiogenese, Stressantworten und metabolischer Anpassung erforscht.

Das SLC25A36 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SLC25A36-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SLC25A36-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SLC25A36 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SLC25A36-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SLC25A36-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SLC25A36-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SLC25A36-Exone abzielen, die für die SLC25A36-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SLC25A36-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SLC25A36 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SLC25A36 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SLC25A36-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SLC25A36 HDR-Plasmid (h) und SLC25A36 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SLC25A36-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SLC25A36-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.