SLC25A33 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-413606

Übersicht

SLC25A33 kodiert einen Carrier der inneren Mitochondrienmembran, der am Transport von Pyrimidinnukleotiden beteiligt ist, die für den intramitochondrialen Nukleinsäurestoffwechsel benötigt werden. Indem SLC25A33 die Replikation und Transkription der mitochondrialen DNA sowie den RNA-Umsatz unterstützt, verknüpft es die Nukleotidhomöostase mit der Kapazität der oxidativen Phosphorylierung und umfassenderen Prozessen der mitochondrialen Qualitätskontrolle. Ein veränderter mitochondrialer Nukleotidtransport kann die Bioenergetik stören und den Replikationsstress erhöhen, wodurch diese Carrier-Familie mit Mechanismen in Verbindung steht, die für Neurodegeneration, Stoffwechselstörungen und proliferative Krankheitskontexte relevant sind. Daher wird SLC25A33 häufig in Modellen zur mitochondrialen Aufrechterhaltung, zum Redoxgleichgewicht und zur stressadaptiven Signalübertragung untersucht.

Das SLC25A33 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SLC25A33-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SLC25A33-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SLC25A33 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SLC25A33-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SLC25A33-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SLC25A33-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SLC25A33-Exone abzielen, die für die SLC25A33-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SLC25A33-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SLC25A33 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SLC25A33 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SLC25A33-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SLC25A33 HDR-Plasmid (h) und SLC25A33 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SLC25A33-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SLC25A33-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.