SLC17A9 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-432833

Übersicht

Slc17a9 kodiert SLC17A9, einen vesikulären Nukleotidtransporter (VNUT), der ATP und andere Nukleotide in sekretorische Vesikel lädt und dadurch eine regulierte purinerge Signalübertragung ermöglicht. Durch die Steuerung des vesikulären ATP-Gehalts beeinflusst SLC17A9 eine exozytoseabhängige Kommunikation, die P2X-/P2Y-Rezeptorwege sowie nachgeschaltete Ca²⁺- und MAPK-gekoppelte Antworten in neuronalen und immunologischen Kontexten aktiviert. Diese Transportfunktion unterstützt Prozesse wie Neurotransmission, Mikroglia-Aktivierung und die Freisetzung inflammatorischer Mediatoren, wodurch Slc17a9 einen hilfreichen Ansatzpunkt zur Untersuchung des neuroimmunen Crosstalks und steriler Entzündung darstellt. Eine dysregulierte vesikuläre ATP-Handhabung und ein veränderter purinerger Tonus wurden mit Schmerzsignalgebung, Neuroinflammation und Gewebeschädigungsreaktionen in Verbindung gebracht, was Slc17a9 zu einem mechanistisch relevanten Ziel für die Untersuchung von Signalwegen in Mausmodellen macht.

Das SLC17A9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Slc17a9-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Slc17a9-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Slc17a9 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SLC17A9-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Slc17a9-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SLC17A9-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Slc17a9-Exone abzielen, die für die SLC17A9-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Slc17a9-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SLC17A9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom SLC17A9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Slc17a9-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SLC17A9 HDR-Plasmid (m) und SLC17A9 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Slc17a9-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Slc17a9-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.