SLAMF1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (canine): sc-437301

Übersicht

SLAMF1 (CD150) ist ein an der Zelloberfläche lokalisiertes Immunrezeptorprotein der SLAM-Familie, das vor allem auf aktivierten T- und B-Lymphozyten, dendritischen Zellen und weiteren hämatopoetischen Zellpopulationen exprimiert wird. Dort koordiniert es die Bildung der immunologischen Synapse und moduliert die Zytokinproduktion. Über homotypische Bindung sowie Adapter-Interaktionen mit SAP/SH2D1A und nachgeschalteten Kinasen beeinflusst SLAMF1 Signalnetzwerke, die mit der Aktivierung von TCR/BCR sowie den MAPK-, PI3K–AKT- und NF-κB-Signalwegen zusammenlaufen und so Aktivierung und Differenzierung von Lymphozyten mitsteuern. In der kaninen Immunologie dient SLAMF1 als Marker der Immunaktivierung und kann antivirale Antworten, die Kommunikation zwischen Leukozyten und die Regulation von Entzündungsprozessen beeinflussen. Eine veränderte SLAMF1-Signalgebung wird allgemein mit Immundysregulation und lymphoproliferativen Phänotypen in Verbindung gebracht und ist damit relevant für mechanistische Studien der Wirtsabwehr und für Modelle immunvermittelter Erkrankungen.

Das SLAMF1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (canine) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des -Gens in canine-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des -Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SLAMF1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von -defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SLAMF1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf -Exone abzielen, die für die SLAMF1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere -Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SLAMF1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (canine) und vom SLAMF1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (canine2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des -Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SLAMF1 HDR-Plasmid (canine) und SLAMF1 HDR-Plasmid (canine2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von -Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten -Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.