Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ska2 (h): sc-405933
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Ska2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Ska2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ska2 Antibody (H-2): sc-514495
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ska2 (h) | sc-405933 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
SKA2 code pour la sous-unité 2 du complexe associé au fuseau et au kinétochore (Ska2), un composant central du complexe SKA qui coopère avec le complexe NDC80 pour stabiliser les attaches kinétochore–microtubule pendant la mitose. Ska2 favorise la congression des chromosomes et l’entrée en anaphase en promouvant une liaison persistante des microtubules en bout (end-on) et en contribuant à l’extinction du point de contrôle du fuseau. Par son rôle dans la progression mitotique, SKA2 influence la dynamique du cycle cellulaire, la fidélité de la ségrégation chromosomique et la stabilité génomique. Une expression ou une fonction dérégulée de SKA2 a été associée à des phénotypes prolifératifs et à l’instabilité chromosomique observés dans plusieurs contextes pathologiques, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques des réponses au stress liées à la division.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Ska2 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SKA2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SKA2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SKA2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Ska2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SKA2 pour l'étude de la signalisation de Ska2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de SKA2 essentiels à la fonction de Ska2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SKA2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Ska2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Ska2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SKA2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Ska2 plasmide HDR (h) et le Ska2 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SKA2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SKA2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.