Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide Double Nickase (m) SIRT7: sc-431608-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) SIRT7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SIRT7 Double Nickase (m) et le plasmide SIRT7 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Sirt7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SIRT7 Antibody (C-3): sc-365344
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) SIRT7 | sc-431608-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Sirt7** code la protéine **SIRT7**, une désacylase nucléaire dépendante du **NAD⁺**, enrichie dans le nucléole, qui régule la transcription de l’ARN ribosomique, l’organisation de la chromatine et la stabilité du génome. SIRT7 module des programmes transcriptionnels par désacétylation de substrats histoniques et non histoniques, et s’inscrit à l’interface de la biogenèse des ribosomes, de la réponse aux dommages de l’ADN et des voies de signalisation du stress métabolique. Une activité altérée de SIRT7 a été associée, dans des modèles expérimentaux, à une prolifération dérégulée, à un remodelage mitochondrial et métabolique, ainsi qu’à des phénotypes cellulaires liés au vieillissement. Ces fonctions font de **Sirt7** une cible utile pour des études mécanistiques de l’homéostasie nucléolaire, du contrôle épigénétique de l’expression génique et des réseaux transcriptionnels d’adaptation au stress.
SIRT7 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Sirt7 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Sirt7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Sirt7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Sirt7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.