Plasmide Double Nickase (h) SIRT2: sc-400590-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SIRT2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SIRT2 Double Nickase (h) et le plasmide SIRT2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SIRT2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SIRT2 Antibody (A-5): sc-28298
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SIRT2 | sc-400590-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SIRT2 | sc-400590-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SIRT2 code une désacétylase dépendante du NAD⁺, principalement localisée dans le cytoplasme, qui module les états d’acétylation des protéines impliqués dans la dynamique des microtubules, la progression du cycle cellulaire et les réponses au stress cellulaire. En désacétylant des substrats tels que l’α-tubuline et des régulateurs du métabolisme, SIRT2 contribue à coordonner le remodelage du cytosquelette, la fidélité mitotique et l’adaptation métabolique, reliant ainsi son activité à des voies influencées par la disponibilité du NAD⁺ et l’équilibre rédox. Des altérations de la fonction de SIRT2 ont été étudiées dans le contexte de la neurodégénérescence, de l’inflammation et de phénotypes liés au cancer, où des changements dans la signalisation dépendante de l’acétylation peuvent affecter la différenciation, la survie et la stabilité génomique. En tant que membre de la famille des sirtuines, SIRT2 est fréquemment étudiée pour son rôle dans l’intégration de la détection des nutriments avec le contrôle épigénétique et post-traductionnel des programmes cellulaires.
SIRT2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SIRT2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SIRT2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SIRT2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SIRT2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.