SIRT1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-430046-LAC

Das murine Sirt1-Gen kodiert die NAD⁺-abhängige Deacetylase SIRT1, einen chromatinassoziierten Regulator, der den zellulären Energiestatus mit transkriptionellen und epigenetischen Programmen verknüpft. SIRT1 moduliert Stressantworten, die mitochondriale Biogenese und die metabolische Anpassung, indem es Zielproteine wie p53, FOXO-Transkriptionsfaktoren, NF-κB und PGC-1α deacetyliert und dadurch Signalwege von Apoptose, Entzündung und oxidativem Stress beeinflusst. Über Crosstalk mit der AMPK–mTOR-Signalgebung, der zirkadianen Regulation und Netzwerken der DNA-Schadensreparatur prägt SIRT1 Zellschicksalsentscheidungen in mehreren Geweben. Eine fehlregulierte SIRT1-Aktivität und -Expression wurde mit metabolischen Störungen, stressbezogenen Phänotypen mit Relevanz für Neurodegeneration, altersassoziierten Prozessen sowie tumorbiologischen Kontexten in Verbindung gebracht, was seine Untersuchung in vielfältigen Mausmodellsystemen unterstützt.

SIRT1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Sirt1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

SIRT1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Sirt1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen SIRT1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Sirt1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.