Plásmido Doble Nickase (h) SIMP: sc-404481-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SIMP consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SIMP (h) y el plásmido de doble nickasa SIMP (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a STT3B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SIMP | sc-404481-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SIMP | sc-404481-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STT3B codifica una subunidad catalítica del complejo oligosacariltransferasa, responsable de la glicosilación N‑ligada en el retículo endoplásmico, con un papel destacado en la modificación postraduccional de glicoproteínas que escapan a la transferencia cotraduccional de glicanos. A través de su contribución al plegamiento proteico, el control de calidad y la degradación asociada al RE, STT3B influye en la proteostasis de la vía secretora y en la maduración de receptores de membrana y secretados. La alteración de la glicosilación dependiente de STT3B puede modificar el tráfico de receptores y los resultados de señalización, vinculando esta vía con respuestas de estrés celular y fenotipos relevantes para trastornos de la homeostasis de glicoproteínas y la biología tumoral. Como nodo central del procesamiento de glicoproteínas en el RE, STT3B se investiga con frecuencia en estudios sobre la regulación de la vía secretora, la biogénesis de receptores inmunitarios y la remodelación de redes de proteostasis.
SIMP El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus STT3B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de STT3B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de STT3B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con STT3B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.