Siglec-6 Double Nickase Plasmid (h): sc-416316-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Siglec-6 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Siglec-6 Double-Nickase-Plasmid (h) und Siglec-6 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf SIGLEC6 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Siglec-6 Double Nickase Plasmid (h) | sc-416316-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Siglec-6 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-416316-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SIGLEC6 kodiert Siglec-6, ein sialinsäurebindendes, immunglobulinähnliches Lektin, das auf ausgewählten Subpopulationen von Immunzellen und auf plazentaren Trophoblasten exprimiert wird und glykanabhängige Zell‑Zell‑Interaktionen vermittelt. Über seine zytoplasmatischen inhibitorischen Motive kann Siglec-6 rezeptornahe Signalwege und zelluläre Aktivierungszustände modulieren und dadurch Prozesse wie Immuntoleranz, Adhäsion und die Reaktionsfähigkeit auf Zytokine beeinflussen. Veränderte Siglec-6-Expression sowie die sialylierungsabhängige Ligandenbindung wurden im Kontext von Immunfehlregulation und entzündlichen Mikromilieus untersucht und auch als Merkmal bestimmter Tumor‑Immun‑Schnittstellen beschrieben. Diese Eigenschaften machen SIGLEC6 zu einem nützlichen Ziel, um glyko‑immunologische Checkpoints, inhibitorische Signalnetzwerke und die Organisation von Zelloberflächenrezeptoren zu analysieren.
Siglec-6 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des SIGLEC6-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von SIGLEC6 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die SIGLEC6-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit SIGLEC6-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.