SH3BGRL CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406958

概要

SH3BGRL（SH3 domain binding glutamate rich protein like）は、SH3ドメインを介したシグナル伝達複合体に関わるタンパク質間相互作用を調節し得る、小型のアダプター様タンパク質をコードします。細胞骨格ダイナミクスの制御、酸化還元（レドックス）応答性シグナル、ならびに細胞の増殖や生存の意思決定に影響するストレス関連経路の調節との関連が報告されています。SH3BGRLの発現異常は複数の腫瘍で報告されており、浸潤性挙動や増殖シグナルの変化との関係で研究されてきました。これらの特徴から、SH3BGRLはシグナル伝達機構、細胞状態の制御、疾患モデルにおける経路の再配線（リワイヤリング）を扱うメカニズム研究において重要な対象となります。

SH3BGRL CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSH3BGRL遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SH3BGRL内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SH3BGRLのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SH3BGRLタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SH3BGRLシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SH3BGRL欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SH3BGRLの機能に不可欠なSH3BGRLエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SH3BGRLゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SH3BGRL CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSH3BGRL CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SH3BGRL遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SH3BGRL HDRプラスミド（h）および SH3BGRL HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSH3BGRLホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSH3BGRL標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。