Septin 3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406325

Descripción general

SEPT3 codifica la septina 3, una proteína citoesquelética de unión a GTP de la familia de las septinas que se ensambla en filamentos heterooligoméricos y estructuras similares a anillos para organizar dominios de membrana. La septina 3 contribuye a procesos asociados a actina y microtúbulos, como el tráfico vesicular, el crecimiento de neuritas y el control espacial de la citocinesis y la polaridad celular, mediante funciones de andamiaje y de barrera de difusión. En el sistema nervioso, la expresión de SEPT3 está enriquecida en neuronas y se ha vinculado con la regulación de la arquitectura sináptica y la dinámica vesicular, conectándola con vías que gobiernan la diferenciación neuronal y la transmisión sináptica. Se han descrito alteraciones en la organización de la red de septinas y cambios asociados a SEPT3 en estudios de neurodegeneración y biología tumoral, lo que respalda su utilidad como nodo mecanístico en investigaciones sobre remodelación del citoesqueleto y de membranas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Septin 3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SEPT3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SEPT3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SEPT3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Septin 3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SEPT3 para la investigación de la señalización de Septin 3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SEPT3 críticos para la función de Septin 3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SEPT3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Septin 3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Septin 3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SEPT3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Septin 3 (h) y el plásmido HDR Septin 3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SEPT3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SEPT3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.