SENP7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405886

Übersicht

SENP7 (sentrin-spezifische Protease 7) ist eine SUMO-spezifische Isopeptidase, die SUMO2/3-Modifikationen von Zielproteinen entfernt und dadurch die Dynamik der SUMOylierung und die Proteinfunktion reguliert. SENP7 wird mit chromatinassoziierten Prozessen in Verbindung gebracht, darunter die Aufrechterhaltung von Heterochromatin und die DNA-Schadensantwort, bei der SUMO-abhängige Signalgebung die Rekrutierung von Reparaturfaktoren und die Genomstabilität koordiniert. Über diese Aktivitäten beeinflusst SENP7 die Zellzyklusprogression und Transkriptionsprogramme, die empfindlich auf den Chromatinzustand reagieren. Eine dysregulierte SUMO-Protease-Aktivität, einschließlich einer veränderten SENP7-Funktion, ist relevant für Studien zu onkogenem Stress, replikationsassoziierten Schäden und weiteren Kontexten, in denen eine abnorme Chromatinregulation zu Krankheitsphänotypen beiträgt.

Das SENP7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SENP7-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SENP7-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SENP7 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SENP7-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SENP7-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SENP7-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SENP7-Exone abzielen, die für die SENP7-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SENP7-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SENP7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SENP7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SENP7-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SENP7 HDR-Plasmid (h) und SENP7 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SENP7-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SENP7-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.