Selenoprotein V Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407114

Descripción general

SELENOV codifica la selenoproteína V, una proteína que contiene selenio, incorpora selenocisteína y está vinculada a la homeostasis redox celular. Al igual que otras selenoproteínas, se asocia con el control del estrés oxidativo y con procesos redox basados en tioles que influyen en el plegamiento de proteínas, la fidelidad de la señalización y la protección frente a especies reactivas de oxígeno. Las alteraciones en la biología de las selenoproteínas y en la utilización del selenio pueden afectar vías implicadas en la inflamación y la regulación metabólica, lo que hace que SELENOV sea relevante para estudios mecanísticos de respuestas adaptativas al estrés. Su perfil de expresión y su actividad redox predicha respaldan su investigación en contextos en los que el equilibrio oxidativo y las redes proteicas dependientes de selenio contribuyen a fenotipos celulares asociados a enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Selenoprotein V (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SELENOV en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SELENOV junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SELENOV tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Selenoprotein V.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SELENOV para la investigación de la señalización de Selenoprotein V, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SELENOV críticos para la función de Selenoprotein V
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SELENOV para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Selenoprotein V CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Selenoprotein V CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SELENOV. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Selenoprotein V (h) y el plásmido HDR Selenoprotein V (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SELENOV para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SELENOV definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.