Selenoprotein V CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407114

Übersicht

SELENOV kodiert Selenoprotein V, ein selenhaltiges Protein, das Selenocystein einbaut und mit der zellulären Redox-Homöostase in Verbindung steht. Wie andere Selenoproteine ist es mit der Kontrolle von oxidativem Stress und thiolbasierten Redoxprozessen assoziiert, die die Proteinfaltung, die Zuverlässigkeit der Signalübertragung und den Schutz vor reaktiven Sauerstoffspezies beeinflussen. Eine veränderte Selenoprotein-Biologie und Selenverwertung kann Signalwege beeinflussen, die an Entzündung und metabolischer Regulation beteiligt sind, wodurch SELENOV für mechanistische Studien stressadaptiver Antworten relevant wird. Sein Expressionsprofil und die vorhergesagte Redoxaktivität sprechen dafür, es in Kontexten zu untersuchen, in denen das oxidative Gleichgewicht und selenabhängige Proteinnetzwerke zu krankheitsassoziierten zellulären Phänotypen beitragen.

Das Selenoprotein V CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SELENOV-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SELENOV-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SELENOV nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Selenoprotein V-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SELENOV-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Selenoprotein V-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SELENOV-Exone abzielen, die für die Selenoprotein V-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SELENOV-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Selenoprotein V CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Selenoprotein V CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SELENOV-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Selenoprotein V HDR-Plasmid (h) und Selenoprotein V HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SELENOV-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SELENOV-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.