SELENBP1 Double Nickase Plasmid (m): sc-422870-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das SELENBP1 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- SELENBP1 Double-Nickase-Plasmid (m) und SELENBP1 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Selenbp1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SELENBP1 Double Nickase Plasmid (m) | sc-422870-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SELENBP1 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-422870-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Selenbp1 codiert für das Selen-bindende Protein 1 (SELENBP1), ein zytosolisches Protein, das an selenabhängigem zellulärem Stoffwechsel und der Redox-Homöostase beteiligt ist. In Mausgeweben wird es mit der Regulation von oxidativen Stressantworten und Prozessen der Proteinhomöostase (Protein-Qualitätskontrolle) in Verbindung gebracht; zudem gibt es Berichte über Zusammenhänge mit zellulärer Differenzierung und dem metabolischen Zustand. Eine veränderte SELENBP1-Expression wurde mit entzündlichen und metabolischen Phänotypen assoziiert und wird häufig als Marker für zelluläre Stressanpassung und tumorbezogene transkriptionelle Reprogrammierung untersucht. Diese Eigenschaften machen Selenbp1 zu einem nützlichen Knotenpunkt, um Selenbiologie, redoxsensitives Signaling und kontextabhängige Veränderungen des zellulären Stoffwechsels zu erforschen.
SELENBP1 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Selenbp1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Selenbp1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Selenbp1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Selenbp1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.