Plasmide Double Nickase (h) Seipin: sc-406865-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Seipin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Seipin Double Nickase (h) et le plasmide Seipin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BSCL2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Seipin | sc-406865-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Seipin | sc-406865-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **BSCL2** code la seipine, une protéine membranaire du réticulum endoplasmique qui organise la biogenèse des gouttelettes lipidiques et favorise un stockage approprié des triacylglycérols en coordonnant les sites de contact entre le réticulum endoplasmique et les gouttelettes lipidiques. La seipine influence la différenciation des adipocytes et les voies de l’homéostasie lipidique, en reliant la synthèse des lipides neutres, le remodelage des phospholipides et la dynamique membranaire des organites. La perturbation de **BSCL2** altère la morphologie des gouttelettes lipidiques et l’équilibre énergétique cellulaire, avec une pertinence établie pour la lipodystrophie généralisée congénitale et les phénotypes neurodégénératifs associés à la seipine, notamment la neuropathie motrice héréditaire distale et des affections apparentées. Ces liens font de **BSCL2** un nœud utile pour étudier le métabolisme lipidique, les réponses au stress de la protéostasie et la vulnérabilité spécifique selon les types cellulaires.
Seipin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BSCL2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BSCL2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BSCL2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BSCL2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.