Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SEC13 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-403302
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SEC13 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico SEC13, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SEC13 Antibody (F-6): sc-514308
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SEC13 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-403302 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
SEC13 codifica Sec13, un componente fondamentale del rivestimento COPII che si associa a Sec31 per formare la gabbia esterna necessaria alla gemmazione delle vescicole dal reticolo endoplasmatico e al trasporto dal RE all’apparato di Golgi. Oltre al traffico secretorio, Sec13 partecipa anche all’architettura del complesso del poro nucleare e supporta la proteostasi influenzando l’esportazione del carico e le risposte allo stress del RE. Queste funzioni collegano SEC13 a vie che regolano il rimodellamento delle membrane, la secrezione proteica e l’omeostasi dei compartimenti intracellulari. La disregolazione della capacità della via secretoria e del trasporto nucleare è spesso sfruttata negli studi sull’adattamento allo stress cellulare e sulla segnalazione proliferativa in contesti rilevanti per la malattia.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SEC13 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SEC13 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SEC13 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SEC13 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SEC13.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SEC13 per lo studio della segnalazione di SEC13, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni SEC13 critici per la funzione di SEC13
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SEC13 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal SEC13 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SEC13 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SEC13. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal SEC13 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SEC13 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SEC13 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SEC13 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.