SCP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422828

Übersicht

Das murine Gen **Scp2** kodiert das Sterol-Carrier-Protein 2 (SCP2), ein kleines Lipid-Transferprotein, das Cholesterin, Gallensäure-Zwischenprodukte und langkettige Fettsäure-Acyl-CoAs innerhalb von Zellen bindet und transportiert, mit wichtigen Funktionen in der peroxisomalen und zytosolischen Lipidverarbeitung. SCP2 unterstützt den intrazellulären Lipidtransport und trägt zur peroxisomalen β-Oxidation, zum Etherlipid-Stoffwechsel und zur Sterolhomöostase bei und ist dabei in umfassendere lipidmetabolische Netzwerke eingebunden, die die Membranzusammensetzung und Reaktionen auf oxidativen Stress beeinflussen. Eine veränderte SCP2-Funktion wurde mit einer gestörten Nutzung von Cholesterin und Fettsäuren in Verbindung gebracht und wird häufig im Kontext metabolischer Dysregulation und lipidgetriebener zellulärer Stressphänotypen untersucht. **Scp2** ist daher relevant für mechanistische Forschung zur Peroxisomenbiologie, zum Lipidtransport und zur Umgestaltung metabolischer Signalwege in krankheitsrelevanten Zelltypen.

Das SCP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Scp2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Scp2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Scp2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SCP2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Scp2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SCP2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Scp2-Exone abzielen, die für die SCP2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Scp2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SCP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom SCP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Scp2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SCP2 HDR-Plasmid (m) und SCP2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Scp2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Scp2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.