SCML1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407161

Übersicht

SCML1 (sex comb on midleg-like 1) kodiert ein mit der Polycomb-Gruppe assoziiertes Protein, das an der chromatinabhängigen Transkriptionsrepression und der Aufrechterhaltung epigenetischer Zustände beteiligt ist. Als Mitglied der SCM-Familie ist SCML1 mit der Biologie der Polycomb-Repressionskomplexe verknüpft und trägt zu einer durch Histonmarkierungen gesteuerten Regulation von Genexpressionsprogrammen bei, die Zellidentität und Entwicklungsprozesse beeinflussen. Eine veränderte Aktivität des Polycomb-Signalwegs ist in vielen Krankheitskontexten breit relevant, da sie mit gestörter Differenzierung und einem genomweiten Ungleichgewicht der Transkription einhergeht; dadurch ist SCML1 ein nützlicher Knotenpunkt für die Untersuchung epigenetischer Kontrollmechanismen. Die Untersuchung von SCML1 unterstützt die Forschung zur Chromatinorganisation, zur Transkriptionsstilllegung und zu nachgeschalteten Effekten auf linienspezifische Gennetzwerke.

Das SCML1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SCML1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SCML1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SCML1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SCML1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SCML1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SCML1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SCML1-Exone abzielen, die für die SCML1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SCML1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SCML1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SCML1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SCML1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SCML1 HDR-Plasmid (h) und SCML1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SCML1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SCML1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.